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化学试剂行业专用试剂生化与分子生物学用试剂

pHyVec4

型号
品牌
价格
¥1300元
供应商:
上海一研生物科技有限公司
产商性质:
经销商
联系人:
陈经理
手机
电话
传真
021-69985186
地址

新品介绍

上市时间:1900-01-01

创新点:Radix dichroae常山探针法PCR鉴定试剂盒 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒“50次““低温““负20度““一年“2-4周
Herba plantaginis车前草探针法PCR鉴定试剂盒 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒“50次““低温““负20度““一年“2-4周
Semen plantaginis 车前子探针法PCR鉴定试剂盒 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒“50次““低温““负20度““一年“2-4周
Pericarpium citri reticulatae陈皮探针法PCR鉴定试剂盒 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒“50次““低温““负20度““一年“2-4周


产品简介

pHyVec4质粒是使用广泛的基因操作工具,可以进行编码基因、microRNA、lncRNA的功能研究、启动子活性、转录因子及3’UTR调控研究等。

详细信息

质粒名称:pHyVec4

质粒规格:2ug

 

实验步骤:

1)质粒提取

1.10,0001min离心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml离心管中

2.加入100溶液1,振荡至彻底悬浮

3.加入200溶液2,立即轻柔颠側离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置

3分钟

4.加入150山溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,10,00g离心10mins

5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的苯酚/氖仿/异成醇混

合均匀10,000离心5min

将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水乙醇,室温放置5-1omin,沉

降DNA

7.10000g离心10分钟,弃乙醇,保留沉淀,加入1ml706的乙醇洗涤沉淀,10,000离

心5分钟

8.倒掉乙醇溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量乙醇

9.加入适量含 Rnase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA

2)质粒鉴定琼脂糖礙胶电泳

灌胶:胶中加入芡光染料〈 SYBR Green)

加样:质粒+上样緩冲液→混匀

电泳

结果观察:UV灯下

 

pHyVec4实验分析:

裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因

用碱裂解法除去杂质

1、防止DNA裂解: Solution1

1)、所含糖增加溶洨黏度,維持渗透压,防止DNA受机械剪切作用降解

2)、所含EDTA抑制酶活性

2、溶解与变性: Solution2

1)强碱使质粒DNA和染色体DNA变性

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